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4.為什么培養(yǎng)基的顏色不一樣?有時候白色有時候是黃色?黃色可以正常使用嗎?
5.培養(yǎng)基需要滅菌和調(diào)節(jié)pH值嗎?
8.Phytotech是否能為客戶定制特殊培養(yǎng)基?
9.Phytotech赤霉素有GA3,GA4+GA7混合物2種形式,有無GA4和GA7單獨組分產(chǎn)品?
10.Phytotech的玉米素及玉米素核苷均為反式,有無順式的產(chǎn)品可以提供?
11.培養(yǎng)基配制調(diào)節(jié)pH值以后出現(xiàn)沉淀,是否正常?會影響植株生長嗎?
14.培養(yǎng)基1000X維生素儲存液出現(xiàn)沉淀,是否正常?
16. Sigma的Phytagel(P8169)我們有無替代產(chǎn)品?有何差別?
18、培養(yǎng)一種特殊的植物物種,想知道使用什么培養(yǎng)基比較合適,有推薦嗎?
19. 培養(yǎng)基不凝固問題,比如此前一直凝固的很好,偶爾會出現(xiàn)不凝固現(xiàn)象
20、玉米素與玉米素核苷的關(guān)系,使用上是否可以替換,替換濃度如何計算?
22、客戶使用不同硬度的凝膠類/瓊脂類產(chǎn)品,例如從A111改成A296,會對培養(yǎng)苗有影響嗎?
25. 結(jié)冷膠導致擬南芥根毛生長問題,根生長受阻,但根毛變的很多?
26、Phytotech包含潮霉素B在內(nèi)的抗生素能否用于哺乳動物細胞培養(yǎng)?
27、C187和C195的椰子粉和椰子汁來源于新鮮椰子還是老椰子?
28、T390、D295、K750、A104、T869、Z899的滅菌方式?
1.常賣的培養(yǎng)基都有哪些?
Phytotech的培養(yǎng)基有很多品種,適合各類植物培養(yǎng),主要有MS,B5,N6,WPM,LS等等,還有蘭科、煙草、胡蘿卜、玫瑰等特殊植物的專用培養(yǎng)基。
2. 培養(yǎng)基的組分是什么樣的?
Phytotech的粉末培養(yǎng)基多數(shù)是大量元素、微量元素、部分含維生素, 不含蔗糖、植物凝膠和植物生長調(diào)節(jié)劑,不過部分MS改良培養(yǎng)基是含的,具體參見產(chǎn)品宣傳單頁或者網(wǎng)站介紹。
3.培養(yǎng)基如何保存?
4.為什么培養(yǎng)基的顏色不一樣?有時候白色有時候是黃色?黃色可以正常使用嗎?
正常培養(yǎng)基是白色偏黃,有的時候顏色比較深是因為培養(yǎng)基中的鐵鹽(尤其是螯合鐵)容易吸潮引起顏色變化,但是這個不會影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,也不會影響植株的生長。
Yes. If this powder is still free-flowing it is fine for use. Many of our media are hygroscopic in nature. This means that when the powder is exposed to air, it absorbs water. This causes the powder to change from a white color to yellow. This reaction can also occur over time as the powder ages. It is advised that the container of media not be left open for extended periods of time when weighing, due to the hygroscopic nature of some of our products.
There are two things to look for when determining whether the media is no longer advisable for use:
- If the powder has absorbed enough water to form clumps that do not easily break apart with pressure, and the powder is no longer free-flowing, then it is advisable to dispose of it. Some clumps in the media are alright, as long as they can still be easily broken apart.
- If the powder does not fully go into solution, and causes a hazy appearance, this could be a sign that the powder is no longer fit for use. However, some of our media have a naturally hazy or slightly hazy appearance, due either to the inclusion of agar, or plant growth regulators that will not go into solution until heated/autoclaved. Please check our COA online to see if a slightly hazy, or hazy appearance is normal for your product if you ever have any doubts about what the solution appearance for this product should be.
5.培養(yǎng)基需要滅菌和調(diào)節(jié)pH值嗎?
二者都需要
常賣的是50L和100L的規(guī)格(一般不提供10L包裝),一般是以粉末形式提供,每升稱取粉末重量見瓶身說明。
僅部分植物凝膠提供試用裝,試用裝申請聯(lián)系我司銷售人員。
8.Phytotech是否能為客戶定制特殊培養(yǎng)基?
可以提供這樣的服務(wù),但是對客戶定制的量有要求,需要量在 100*100L以上,客戶提供配方后我司協(xié)助咨詢廠家,承諾配方保密性。
9.Phytotech赤霉素有GA3,GA4+GA7混合物2種形式,有無GA4和GA7單獨組分產(chǎn)品?
沒有。
10.Phytotech的玉米素及玉米素核苷均為反式,有無順式的產(chǎn)品可以提供?
玉米素及玉米素核苷分為反式和順式2種形式,起調(diào)節(jié)作用的主要是反式形式,順式形式的調(diào)節(jié)作用很不明顯,所以一般都使用的是反式形式的玉米素及玉米素核苷。目前只有Sigma有順式玉米素,價格比較高,Phytotech一般不提供順式的產(chǎn)品,如果用量比較大(如1g)可以考慮訂制。
11.培養(yǎng)基配制調(diào)節(jié)pH值以后出現(xiàn)沉淀,是否正常?會影響植株生長嗎?
一般培養(yǎng)基配制后需要將ph值調(diào)節(jié)到植株生長最佳值,常用NaOH或者KOH,廠家驗證沉淀不會影響植株生長,如果想要消除沉淀,建議采用KOH重新調(diào)節(jié)。如果使用有沉淀的培養(yǎng)基影響了植株的生長,請客戶提供圖片及相關(guān)產(chǎn)品使用信息,我司跟廠家反饋,進行產(chǎn)品投訴。
12.產(chǎn)品一般保質(zhì)期是多久?
一般粉末培養(yǎng)基有效期為3-4年時間,其他粉末產(chǎn)品為2年以上,液體產(chǎn)品為1年以上,具體時間根據(jù)產(chǎn)品包裝外的批號到官方網(wǎng)站查詢COA核對產(chǎn)品出廠的檢測信息。
Phytotech生化試劑純度沒有統(tǒng)一規(guī)格,具體純度需要查看產(chǎn)品說明書或者COA。
14.培養(yǎng)基1000X維生素儲存液出現(xiàn)沉淀,是否正常?
出現(xiàn)沉淀的原因是因為里面含有100 g/L的肌醇,在常溫下容易析出,另外1000X濃度比較高,低溫情況下溶解度降低,容易飽和析出;
解決辦法1:可以將產(chǎn)品放在37度水浴10-15分鐘,間隔搖晃,沉淀就會消失,此方法不會影響產(chǎn)品的質(zhì)量和對植物生長的影響;
解決辦法2:將1000X儲存液稀釋成100X溶液,分裝保存。
15.我們的產(chǎn)品都是無菌的嗎?
粉末培養(yǎng)基在開封前是保證無菌的,但是在使用時建議再次滅菌,因為在配制液體培養(yǎng)基時,容易染菌;維生素溶液、植物生長調(diào)節(jié)劑溶液、液體培養(yǎng)基(儲存液)、鹽溶液、部分緩沖液都是經(jīng)過過濾滅菌的,在保證不染菌的情況下,可以不用再次滅菌。抗生素溶液產(chǎn)品,除用DMSO溶解的產(chǎn)品以外,都是經(jīng)過過濾滅菌的,但是大部分抗生素溶液產(chǎn)品是干冰運輸,目前沒辦法進口,有部分是藍冰運輸,可以進口,但是可能需要加運費,具體請咨詢我司客服。
16. Sigma的Phytagel(P8169)有無替代產(chǎn)品?有何差別?
Phytagel的本質(zhì)就是結(jié)冷膠,我們的結(jié)冷膠有G434和G3251,根據(jù)廠家提供的信息,Phytotech品牌的G434、G3251和Sigma 品牌P8169產(chǎn)品性質(zhì)是一樣的,使用也相同。而G3251是G434的升級產(chǎn)品(原料供應(yīng)更好),所以價格更高一些。
注意:G434與氨基酸糖苷類抗生素(特別是卡那霉素和潮霉素B)一起使用對植物生長有影響。如遇此類情況,建議降低抗生素的使用濃度。同時建議嘗試用G434替換P8169時注意抗生素使用情況。
17、結(jié)冷膠使用注意事項
結(jié)冷膠的溶解要求比較特殊,一是溫度,結(jié)冷膠不溶于冷水,一定要是加入熱水攪拌溶解;二是培養(yǎng)基中二價陽離子濃度是結(jié)冷膠凝固的關(guān)鍵,一般是Mg2+,和Ca2+這2種離子的總濃度在4-10mM適中,而且2種離子的濃度最好都不要低于1.5mM,低于或者過高都會影響凝膠效果,一般來說MS培養(yǎng)基中二價離子濃度是足夠的,1/2MS培養(yǎng)基用結(jié)冷膠也可以凝固的很好,有部分客戶使用的其他類型的培養(yǎng)基會低于普通MS,甚至比1/2MS更低,如果二價陽離子總濃度過低影響了凝膠效果,則需要補充足夠二價陽離子,如果由于培養(yǎng)基類型或者元素含量限制,則不適合使用結(jié)冷膠類的凝膠產(chǎn)品,建議更換瓊脂或者卡拉膠,目前確定不適合用結(jié)冷膠的培養(yǎng)基有DKW,SH,LS。三是pH值,結(jié)冷膠凝固最適合ph值為5.8,一般高溫滅菌影響不大,但不排除因為高壓條件變化導致ph值變化影響的凝膠效果。
18、培養(yǎng)一種特殊的植物物種,想知道使用什么培養(yǎng)基比較合適,有推薦嗎?
我們培養(yǎng)基產(chǎn)品有一些是專門適用特殊物種,還有一些能適應(yīng)多種植物。如果客戶能給詳細描述植物的情況,我們可以推薦一些培養(yǎng)基,但不能夠提供許多植物的實驗操作,尤其是一些稀有的植物。對一些物種我們可以提供一些相關(guān)技術(shù)論文輔助客戶選擇植物培養(yǎng)基。
19. 培養(yǎng)基不凝固問題,比如此前一直凝固的很好,偶爾會出現(xiàn)不凝固現(xiàn)象
植物凝膠尤其是瓊脂不凝固是與ph值有關(guān)系,ph過低導致的。出現(xiàn)此類情況是因為調(diào)節(jié)ph值的操作問題,很多客戶都先調(diào)節(jié)了ph值,然后再加入了植物凝膠,這個過程中ph值可能會降低到5.2,才會不凝固。解決辦法:加入瓊脂粉后調(diào)節(jié)ph值,熱可逆過程ph值會恢復(fù)到5.8,瓊脂凝固不會出現(xiàn)問題。
It is very important that your customer adjust the pH after every component is added to the medium. If they adjusted it before they added their homemade agar, their agar could have lowered the pH below 5.2 causing it not to gel. This is a very common problem, where customers think they cannot adjust the pH after they add the agar because the agar isn’t dissolved.
Though pH can change with temperature, this is a thermodynamically reversible process, so upon cooling the pH will return to the original pH. Once dissolved, if your customer is preparing their media correctly, we should have the same components in solution. The only difference should be the pH.
20、玉米素與玉米素核苷的關(guān)系,使用上是否可以替換,替換濃度如何計算?
目前2者之間的關(guān)系暫時沒有非常完整明確的定論,但基本能確定的是玉米素核苷是細胞分裂素的轉(zhuǎn)運形式,并不是玉米素的活性形式,參考文獻:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5296302/,https://link.springer.com/article/10.1007/BF00390846.
玉米素價格要比玉米素核苷優(yōu)惠。所以,如果考慮成本,打算將玉米素核苷替換成玉米素,建議按照等摩爾分子量來替換。具體如下:2 mg/L的 Z899添加量換算為Z125 的添加量是1.25 mg/L。所以使用玉米素的成本,不僅僅是售價可以降低,從使用量來看也是降低的。
21、瓊脂選購注意事項
瓊脂是藻類提取加工所得,而原材料受生長環(huán)境,氣候等各方面影響變化差異較明顯,從而會導致各生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品批間差異。主要變化在于凝膠強度,顏色,離子濃度等差異,這個問題一直是瓊脂供應(yīng)商中普遍存在且不可克服的問題,尤其在近年來原材料異常緊缺的情況下容易突顯,即使是同一片產(chǎn)地,當時的溫度和環(huán)境的變化都會影響到原材料的性質(zhì),造成所提取瓊脂的質(zhì)量的變化,難以保證批間差穩(wěn)定,這是瓊脂這類產(chǎn)品的特殊性質(zhì),不是能夠通過生產(chǎn)工藝和技術(shù)加以改善的。所以,當客戶選購不同批次的瓊脂粉的時候,一定要特殊注意批次之間的強度變化,如果和之前所選用的產(chǎn)品的強度一致,那么可以按照之前的用量使用,如果強度不一致,建議做凝固實驗,尋找最合適的培養(yǎng)基瓊脂濃度,從而保證實驗的順利穩(wěn)定。
簡易測試條件:
濃度 |
50ml測試體系 |
4 g/L |
0.2g |
5 g/L |
0.25g |
6 g/L |
0.3g |
7 g/L |
0.35g |
8 g/L |
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22、客戶使用不同硬度的凝膠類/瓊脂類產(chǎn)品,例如從A111改成A296,會對培養(yǎng)苗有影響嗎?
酒精揮發(fā),溶劑減少,溶質(zhì)析出
請查看說明書,如果說明書中未明確提出請聯(lián)系我司客服咨詢廠家。
25. 結(jié)冷膠導致擬南芥根毛生長問題,根生長受阻,但根毛變的很多
原因:結(jié)冷膠強度會影響根毛生長,批件差的凝膠強度不同,需要根據(jù)凝膠強度調(diào)整使用濃度即可。
It is known that gellan gum concentration can affect root growth. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3967087/
As Gelzan is a product of microbial fermentation, there will be lot-to-lot variability. We report the gel strength of each lot of Gelzan on our CoA’s (see attached). Your customers previous lot 14M3251043 had a gel strength of 439 g/cm2. This lot 15L3251051 has a gel strength of 523 g/cm2. When used at the same concentration, an increase gel strength is the same as an increase in concentration.
Many of our customers who have seen gel strength variation affect plant growth will use the following formula:
Where X is the Gelzan concentration (e.g. g/L, %) that produced optimal growth at 439 g/cm2, and Y is the Gelzan concentration to use with the lot that had a 523 g/cm2 gel strength but have the same apparent gel strength as the original results with X g/L of Gelzan than was 439 g/cm2
26、Phytotech包含潮霉素B在內(nèi)的抗生素能否用于哺乳動物細胞培養(yǎng)?
不可以。
27、C187和C195的椰子粉和椰子汁來源于新鮮椰子還是老椰子?
均來源于新鮮椰子。
28、T390、D295、K750、A104、T869、Z899的滅菌方式?
T390、D295和K750高壓滅菌;A104和T869過濾除菌;Z899建議過濾除菌
Z899, the “active” part of this compound, trans-Zeatin (Prod. No. Z125) is autoclavable. I would assume the ribosyl linkage is autoclave stable, but to be safe, we would recommend filter-sterilizing.
29、植物凝膠高壓滅菌后不凝固的常見原因?
PH值太低(低于5.2),通常情況下瓊脂在低PH值下不會凝固;高壓時間過長或溫度/壓力過高,瓊脂分子之間的鍵會斷裂;鈣的含量過高,Quoirin&Lepoivre Basal Salts and DKW等培養(yǎng)基中含鈣量高,會抑制結(jié)冷膠的凝固。